martes, 23 de noviembre de 2010
Práctica 3 Digestión de albumina por pepsina industrial
Digestión de la albúmina por “pepsina” industrial
Preguntas generadoras:
1. ¿Cómo actúa la pepsina sobre las proteínas?
La pepsina del jugo gástrico actúa sobre las proteínas de los alimentos que se transforman en polipéptidos, que posteriormente podrán ser reducidos por otros enzimas a unidades más sencillas.
2. ¿Cómo están formadas las proteínas?
Las proteínas están compuestas de aminoácidos de varios tipos, dispuestos en proporciones variables; su característica común es que todas contienen el elemento nitrógeno (N).
3. ¿Qué es la pepsina?
La pepsina es una peptidasa, una enzima digestiva que degrada las proteínas en el estómago
4. ¿Cuál es el papel que desempeñan las proteínas del alimento, en los animales?
Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las biomoléculas más versátiles y más diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:
• Estructural
• Reguladora
• Transportadora
• Defensiva
• Enzimática
5. ¿Por qué es necesario que se digieran las proteínas del alimento?
Porque de no ser descompuestas en aminoácidos, no pueden ser absorbidas por las células, ya que son moléculas demasiado complejas para que las células de nuestro cuerpo las usen.
6. ¿Qué es la hidrólisis de una proteína?
La hidrólisis es la descomposición de las moléculas de una sustancia en agua. En la hidrólisis se rompen los enlaces peptídicos y deja de ser proteína dando lugar a los distintos aminoácidos que formaban la proteína.
7. ¿Qué papel desempeña el ácido clorhídrico al actuar sobre la pepsina?
Algunas enzimas se encuentran en estado inactivo y necesitan de otras sustancias para ser activadas, en esta caso , el ácido clorhídrico activa la pepsina.
Introducción
El jugo gástrico, elaborado por las glandulas de la mucosa del estomago, contiene ácido clorhídrico libre y dos enzimas: quimosina y pepsina.En realidad ambas son secretadas como proenzimas inactivas y en presencia del ácido clorhídrico se transforman espontáneamente en enzimas activas.
pepsinogeno--------------ácido clorhídrico----------- pepsina
Objetivos:
• Identificar la acción de la pepsina sobre las proteínas
• Identificar los productos de la acción de la pepsina sobre las proteínas
• Comprender la acción de los jugos gástricos en la digestión química del alimento
• Conocer cómo se puede activar una enzima
Material:
1 vaso de precipitados de 1000 ml
Papel filtro
1 embudo
1 probeta de 100 ml
1 gradilla
4 tubos de ensayo
4 probetas de 10 ml
Gasas
Material biológico:
Claras de huevo
Sustancias:
Ácido clorhídrico 0.1 N
Reactivo de Biuret
Pepsina
Equipo:
1 balanza granataria electrónica
1 parrilla con agitador magnético
Procedimiento:
Bate la clara de huevo cruda en un litro de agua fría, y llévala hasta la ebullición, sin dejar de batir. Fíltrala. El líquido que se obtiene es una fina suspensión, muy estable, de albúmina desnaturalizada. Prepara, por otro lado, jugo gástrico artificial, diluyendo en 100 ml de agua, 1 g de jugo gástrico desecado, que se vende en las farmacias bajo la denominación de “pepsina”, nombre que proviene de la enzima principal que contiene.
Prepara en cuatro tubos de ensayo, las siguientes mezclas:
1. 6 ml de albúmina + 6 ml de agua.
2. 6 ml de albúmina + 1,5 ml de agua + 4,5 ml de HCl, 0.1 N.
3. 6 ml de albúmina + 1,5 ml de pepsina + 4,5 ml de agua
4. 6 ml de albúmina + 1,5 ml de pepsina + 4,5 ml de HCl 0.1 N.
A continuación coloca los tubos a baño María, a 40° C. Algunos minutos más tarde, únicamente en el tubo 4 se producirá un aclarado, esto es consecuencia de la actividad de la pepsina que, en medio ácido, ha hidrolizado a la albúmina.
Resultados:
contenido del tubo | reacción con biuret |
| albumina + agua | negativo |
| albumina+ agua+ácido clorhídrico | negativo |
| albumina +pepsina+agua | negativo |
| albumina + pepsina+ácido clorhídrico | positivo |
Análisis de resultados:
Elabora la caracterización de los siguientes conceptos: proteína, hidrólisis, enlace peptídico, polipéptido, aminoácido, digestión química, enzima activa, enzima inactiva.
| Concepto | Características |
| Proteína | Son macromoléculas constituidas por cadenas de aminoácidos. Son indispensables para el crecimiento del organismo. |
| Hidrólisis | Es una reacción química que sucede entre agua y otra sustancia como las sales. |
| Enlace peptídico | Es un enlace covalente entre un grupo amino de un aminoácido y un grupo carboxilo de otro aminoácido, las proteínas y los péptidos están constituidos por aminoácidos que son unidos por enlaces peptídicos. |
| Polipéptido | Es un péptido grandes, son más de 10 aminoácidos, y cuando su estructura es estable significa que es una proteína |
| Aminoácido | Es una molécula orgánica con un grupo amino y uno carboxilo, las más importantes son las que forman las proteínas. |
| Digestión química | Son las reacciones biológicas que producen las enzimas, rompiendo enlaces para que las moléculas complejas pasen a ser moléculas sencillas. |
| Enzima activa | En una enzima formada por una proteína y una coenzima, es una enzima completa y catalíticamente activa. |
| Enzima Inactiva | Son las que más comúnmente contaminan a las enzimas activas. |
Replanteamiento de las predicciones de los alumnos:
La pepsina es una enzima inactiva que necesita del ácido clorhídrico para activarse y esta descompone o digiere a las proteínas, por eso en las reacciones que realizamos en la practica la única que salio positiva fue cuando combinamos la albumina con la pepsina y el ácido clorhídrico por que eso podríamos decir que sucede en el estomago de cada uno de nosotros cuando ingerimos alimentos.
CONCEPTOS
Digestión de proteínas: las proteínas, al ser ingeridas, se degradan por medio de las enzimas (proteasa, pepsina) en donde se convierten en aminoácidos, donde después se incorporan en la microvellosidad del intestino delgado para luego ser incorporados a las células para formar nuevas enzimas.
Pepsina: enzima digestiva que degrada las proteínas en el estómago, hidroliza los enlaces peptídicos interiores de una proteína Sitio de producción de pepsina en el aparato digestivo humano: jugos gástricos, algunos componentes del jugo gástrico sólo se activan cuando se exponen a la alcalinidad del duodeno; la secreción es estimulada por el acto de masticar y deglutir e incluso por la visión o idea de cualquier comida.
Sitio de hidrólisis total de las proteínas en el aparato digestivo humano: el intestino delgado
Relaciones.
Esta actividad de laboratorio coadyuva a la construcción del concepto de digestión química, en este caso, asociada con la degradación de las proteínas. Es importante relacionar los órganos donde se inicia y termina esta hidrólisis.
http://www.ikerlarre.e.telefonica.net/paginas/digestion.htm
http://www.produccion-animal.com.ar/informacion_tecnica/suplementacio...
http://es.wikipedia.org/wiki/Pepsina
http://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna
Práctica 2 Acción de la amilasa sobre el almidón
Acción de la amilasa sobre el almidón
- Preguntas generadoras:
l. ¿Cómo actúa la amilasa sobre el almidón?
Esta enzimas actúan sobre el almidón hidrolizando.
ll. ¿Cómo está formado el almidón químicamente?
El almidón está realmente formado por una mezcla de dos sustancias, amilasa y amilopectina, que sólo difieren en su estructura: la forma en la que se unen las unidades de glucosa entre si para formar las cadenas. Pero esto es determinante para sus propiedades. Así, la amilasa es soluble en agua y más fácilmente hidrolizable que la
amilopectina (es más fácil romper su cadena para liberar las moléculas de glucosa) .
lll. ¿Qué es la amilasa desde el punto de vista químico?
Es la encargada de degradar a los carbohidratos ricos en energía química.
lV. ¿Cuál es papel que desempeña el almidón en los animales?
El almidón desempeña un papel importante como reserva de energía en los animales.
V. ¿Por qué es necesario para los animales que la amilasa actúe sobre el
almidón?
La digestión en los animales y algunas plantas, ocurre a niveles multicelular, celular y subcelular, la amilasa actúa sobre el almidón como lubricante y causa que las partículas de alimento se degraden con mayor facilidad.
- Introducción:
La amilasa es una sustancia que actúa como enzima, es decir, se trata de un catalizador que acelera las reacciones químicas, en este caso actúa durante la digestión sobre las moléculas del almidón, el cual descompone para formar azucares simples, específicamente glucosa libre y maltosa; y permitir que el organismo las digiera. Esta enzima es producida principalmente por las glándulas salivales y pancreáticas y lo que hace es romper las uniones entre los azucares que conforman el almidón para que puedan ser digeridos facilmente en el resto del proceso.
- Objetivos:
· Identificar la acción de la amilasa de la saliva sobre el almidón
· Identificar los productos de la acción de la amilasa sobre el almidón
· Caracterizar la digestión enzimática realizada por la secreción de las glándulas salivales.
- Material:
-Papel filtro
-Embudo
-5 tubos de ensayo
-2 goteros
-2 cápsulas de porcelana
- Material biológico:
Muestra de saliva
- Sustancias:
-Agua destilada
-Almidón
-Reactivo de Benedict
-Reactivo de Lugol para almidón
-Equipo:
-Balanza granataria electrónica
-Parrilla con agitador magnético
- Procedimiento:
A. Obtención de la enzima amilasa
Después de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro para estimular la salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1 ml.
La saliva así obtenida se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua destilada, así se obtiene la preparación de enzima base.
Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g
de almidón y se disuelven en 100 ml de agua destilada.
Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la enzima. En otro tubo se colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2%. Los tubos se colocan en baño maría a 37° C, durante 15 minutos dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón.
Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño maría y se harán las pruebas del lugol y Benedict.
B. Reacciones de lugol para almidón y Benedict
La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta característico. Toma 1 ml de la disolución de cada uno de los tubos y añade unas gotas de lugol a cada una de ellas. Si no existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva.
La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Toma 1 ml de cada uno de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño María, si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares como la glucosa y la maltosa. 
- Resultados:
Contenido del Tubo | Reacción de Lugol | Reacción de Benedict |
Amilasa+ almidón +agua | Negativo | Positivo |
Almidón+agua | Positivo | Negativo |
- Análisis de resultados:
Elabora la caracterización de los siguientes conceptos: enzima, digestión química, digestión mecánica, degradación, saliva, azúcares simples, azúcares complejos, polímeros y monómeros.
| Concepto | Características |
| Enzima | Es una proteína que ayuda a acelerar o a disminuir la velocidad de alguna reacción bioquímica del metabolismo. |
| Digestión química | Se lleva a cabo por las enzimas y estas hacen que las moléculas complejas se transformen en moléculas sencillas. |
| Digestión mecánica | Es la trituración del alimento y es realizada por la masticación de los dientes. |
| Degradación | Descomposición de una sustancia por rotura de los enlaces que unen los elementos químicos que la forman. |
| Saliva | Es una sustancia líquida que humedece y facilita la masticación de los alimentos, está compuesta principalmente por agua, contiene una enzima llamada tialina que digiere el almidón. |
| Azúcares simples | Son de rápida absorción y digestión, están formados por un monosacárido. |
| Azúcares complejos | Están compuestos por muchas moléculas de glucosa, su digestión es más lenta que las simples. |
| Polímeros | Es una molécula formada por subunidades similares o idénticas. |
| Monómeros | Es una molécula simple y pequeña que al unirse con otras puede formar un polímero. |
- Conceptos clave:
Enzima, digestión, digestión química, degradación, secreciones de glándulas del aparato digestivo, reacciones químicas en el interior del cuerpo, azúcares simples, azúcares complejos, polímeros y monómeros.
- Relaciones.
Este tema es importante porque permite observar en el laboratorio la acción de las secreciones de las glándulas salivales, las que llevan a cabo una digestión química de los polisacáridos, apoya a los estudiantes en la construcción del concepto de digestión química y permite comprender la función de algunas glándulas asociadas al aparato digestivo.
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